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介绍显微镜常用的观察方法

点击次数:102 发布时间:2021-04-26
  为了更好的观察不同种类产品,显微镜有多种观察方法,常见显微镜观察方法主要有明场、暗场,偏光、微分干涉DIC,荧光等,其原理及应用范围均有所不同,详情如下:
  1、明场观察是常见显微镜观察方法中大家较常用的一种观察方式,利用照明光线直接照射在被测产品反射回来后观察,此种观察方式基本每款显微镜都具备。其广泛应用于病理、检验,用于观察被染色的切片。
  2、暗场观察。暗场观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。它的特点是不让光束由下至上的通过被检产品,而是将光线改变途径,使其斜射向被检产品,使照明光线不直接进入物镜,利用被检产品表面反射或衍射光形成的明亮图像。此时,视场为黑暗的是背景,而被检物体则呈现明亮的像。暗场观察的原理是根据光学上的丁道尔现象,微尘在强光直射通过的情况下,人眼不能观察,这是因为强光绕射造成的。若把光线斜射它,由于光的反射,微粒似乎扩大了体积,为人眼可见。
  暗场观察的分辨率远高于明场观察,达0.02-0.004μm。
  3、微分干涉观察,DIC利用的是偏振光,有四个特殊的光学组件:偏振器(polarizer)、DIC棱镜、DIC滑行器和检偏器(analyzer)。微分干涉观察是利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束。分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等,光束分别在距离很近的两点上通过被检物体,在相位上略有差别。由于两光束的裂距非常小,而不出现重影现象,使图像呈现出立体的三维感觉。
  据相关数据分析,其DIC观察方法出现于60年代,它不仅能观察无色透明的物体,而且图像呈现出浮雕状的立体感,并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点,观察效果更为逼真。
  4、偏振光观察,偏光显微镜须需包含起偏镜,检偏镜,补偿器或相位片,专用无应力物镜,旋转载物台等附件。偏光显微镜是将普通光改变为偏振光进行镜检的方法,以鉴别某一物质是单折射(各向同性)或双折射性(各向异性)。双折射性是晶体的基本特性。偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而须利用偏光显微镜。因此,偏光显微镜被广泛的应用在矿物、化学等领域,在生物学和植物学也有应用。
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